Nick Daley đang theo bước cha mình làm người gác đêm tại Bảo tàng Lịch sử Tự nhiên Hoa Kỳ, vì vậy anh biết điều gì sẽ xảy ra khi mặt trời lặn. Nhưng khi kẻ thống trị điên cuồng Kahmunrah trốn thoát, Nick phải một lần cứu được bảo tàng và cho tất cả.